熒光檢測濾光片的原理及作用
2024-08-05
派大星
熒光檢測濾光片是一種用于熒光分析、熒光顯微鏡等領域的光學元件,它一般由光學性能優良、熱膨脹系數小的材料如光學玻璃(如硼硅酸玻璃、石英玻璃等)或熔融石英作為基底,通過在基底上鍍上多層介質膜(鍍膜材料:金屬如銀、鋁、金等、金屬氧化物如二氧化硅、二氧化鈦等、氟化物等),這些介質膜的厚度和折射率經過精密計算,以實現對特定波長的光的選擇性透過或反射,經過濾光片的各項參數指標進行測量后滿足指標才算真正的制造完成。
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熒光檢測濾光片的原理
熒光物質在吸收特定波長的光(激發光)后,會發射出波長較長的光(發射光)。熒光濾光片就是根據這個原理,通過選擇性的透光特性,將激發光和發射光分離,從而實現對熒光信號的檢測。
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熒光檢測濾光片分類
常見的熒光顯微鏡中,由熒光濾光片通常組合成濾光塊。一個典型的濾光塊包括激發濾光片、發射濾光片以及二向色鏡。
激發濾光片: 透過激發光,阻擋其他波長的光。
發射濾光片: 透過發射光,阻擋激發光和散射光。
二向色鏡: 將激發光反射到樣品上,同時將發射光透射出去。
熒光檢測濾光片的選用
選擇合適的熒光檢測濾光片,需要考慮以下因素:
熒光染料的激發和發射波長:濾光片的透光范圍應與熒光染料的激發和發射波長相匹配。
背景熒光:濾光片應能有效地濾除背景熒光,提高信噪比。
光源: 濾光片的透光范圍應與光源的波長范圍相匹配。
熒光檢測濾光片的重要作用
提高信噪比:通過濾除背景光,提高熒光信號的檢測靈敏度。
改善圖像質量:獲得清晰、高對比度的熒光圖像。
實現多色熒光成像:通過組合不同波長的濾光片,可以同時檢測多種熒光染料。
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熒光檢測濾光片